影音先锋资源站,客厅玩朋友娇妻hd完整版视频,奇迹少女第四季,亚洲日日做日日谢日日鲁

產(chǎn)品目錄   Product catalog
聯(lián)系我們   Contact
搜索   Search
技術(shù)文章   Article首頁(yè)>>技術(shù)文章>>視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19?實(shí)驗(yàn)報(bào)告

視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19?實(shí)驗(yàn)報(bào)告

點(diǎn)擊次數(shù):540 更新時(shí)間:2024-05-30

視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


上一篇 人整合素α4酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟 下一篇 猴slit同源物2ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)

021-69985169
13611928337

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
精品一区二区三区在线观看| 杨思敏1—5集无删减在线观看| 午夜精品一区二区三区在线观看| 亚洲在线视频| 卧底女警张腿迎合交换献身| 国产精品毛片无遮挡高清| 国产放荡对白视频在线观看| 粉嫩xb粉嫩xb粉嫩xb| 久久国产欧美国日产综合抖音| 中国熟妇xxxx| 97无码欧美熟妇人妻蜜桃天美| 无码欧美人xxxxx日本漫画| 偷国精产品久拍自产| bgmbgmbgm老太太视频| 欧美另类vivox21老少配| 日日麻批免费40分钟无码| 野外玩弄大乳孕妇| 久久久久成人精品免费播放动漫| 最近中文字幕高清字幕mv| 国产精品无码一区二区三区免费| 一尘网中国投资资讯网 | 国色天香久久久久久久小说| 亚洲av无码乱码精品国产福利| 性一交一乱一乱一视一频| 免费观看片的app下载| 绿巨人app下载| 国精产品一区二区三区有限公司| 精品无人妻一区二区三区| 老熟女av福利网址导航| 国产免费av| 国产精品毛片无遮挡高清| 亚洲欧美精品aaaaaa片| s货c货大声点叫| 久久亚洲精品中文字幕无男同| 杂交bucsm人类ssba| 国产精品无码一区二区三区免费| 一区二区三区在线观看| 特级aaaaaaaaa毛片免费视频| 国产+高潮+白浆| h漫在线观看| 乌克兰少妇xxxx做受野外|