影音先锋资源站,客厅玩朋友娇妻hd完整版视频,奇迹少女第四季,亚洲日日做日日谢日日鲁

產(chǎn)品目錄   Product catalog
聯(lián)系我們   Contact
搜索   Search
技術(shù)文章   Article首頁(yè)>>技術(shù)文章>>視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19?實(shí)驗(yàn)報(bào)告

視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19?實(shí)驗(yàn)報(bào)告

點(diǎn)擊次數(shù):540 更新時(shí)間:2024-05-30

視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞;ARPE-19實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


上一篇 人整合素α4酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟 下一篇 猴slit同源物2ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)

021-69985169
13611928337

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
无码里番纯肉h在线网站| 一本一本久久a久久精品综合麻豆| 侵犯小太正bl浴室| 欧美喷潮久久久xxxxx | xxxxx性bbbbb欧美| 又白又嫩毛又多15p| 强行挺进美艳老师的后臀| 国产性猛交╳xxx乱大交 | 竹菊精品久久久久久久99蜜桃| 最近2019中文字幕电影免费看 | 国产猛男gayb0y1069| 国产精品久久久久久久9999| 农民工猛吸女大学奶头| 啊灬啊灬啊灬免费毛片| 奶水h人妻销魂共妻高h| 粗大的内捧猛烈进出a片男男| 高中浪荡女挨cao日常| 97精品国产97久久久久久免费| 一本久道久久综合狠狠躁| 亚洲av成人片色在线观看高潮| 亚洲av成人片无码www| 欧美黑人性暴力猛交喷水| 亚洲区色情区激情区小说色情书 | 黑人强开嫩模又小又紧| 特黄a级毛片免费视频| 再深点灬舒服灬太大了少妇| 99精产三产区区别| 色综合久久精品亚洲国产| 丝袜灬啊灬快灬高潮了AV| 精品人妻中文无码av在线 | 亚洲欧美日韩久久精品第一区| 灌满精撞击小腹鼓起h| 国内精品久久毛片一区二区| 成人视频网站| 娇小搡bbbb搡bbbb| 亚洲av无码一区二区二三区软件| a片人人澡c片人人人妻| 亚洲国产精品18久久久久久| 欧洲-级毛片内射| 调教小荡货h办公室| 男人添女人囗交做爰视频|